2025年7月1日起，欧洲药典（EP）11.8正式删除家兔热原法（RPT），单核细胞活化反应测定法（MAT）成为唯一推荐的替代方法。这一变革不仅是欧洲减少动物试验整体监管策略的重要组成部分，更标志着体外检测方法将在未来质量控制中逐渐占据主导地位。

面对这一强制性法规变更，如何高效完成MAT方法转型并顺利通过申报，成为制药企业关注的核心问题。本文将结合EP 2.6.30的最新要求，分享湖州申科助力客户原料药CEP获批的实践经验与申报要点。

一、法规背景：MAT从“可选”到“必选”的全球监管协同

自 2010 年 MAT 作为替代检测手段被纳入欧洲药典（EP 2.6.30 章节）以来，该方法现已成为评估全谱系热原的唯一方法。

• 美国食品药品监督管理局（FDA）于 2012 年发布行业指南，认可 MAT 作为热原检测的替代方法。美国药典（USP）亦将其收录为替代方法。

• 俄罗斯和欧亚药典中，MAT 被正式列为药典方法。

• 在中国、印度和巴西药典中作为替代方法，在日本则作为补充方法收录。

此次EP 11.8的法规更新，意味着在欧盟上市或销售的注射剂、生物制品及医疗器械企业，需要重点关注以下合规要求：

•  方法转型：尽快建立并验证MAT检测能力，或委托具备资质的机构进行；

•  文件更新：相应修订注册档案中的质量控制方法及相关标准操作规程（SOP）；

•  合规申报：根据指南要求提交相应类型的变更申请。

二、核心更新：EP 11.8版本MAT申报关键要点

根据最新法规要求，成功完成产品质量控制 MAT 方法申报需重点关注以下关键环节：

风险评估先行：

•  基于产品特性、生产工艺及原材料来源，进行全面热原污染风险评估；

•  若仅使用细菌内毒素检测法（BET），必须提供科学数据，证明产品中不存在非内毒素热原（NEPs）风险；

•  建议：在工艺开发阶段即引入MAT方法，建立完整的NEPs控制策略。

尤其值得关注的是非内毒素热原（NEPs）的检测要求：根据EP 5.1.13“致热原性”章节的明确规定，仅当能够科学排除非内毒素热原物质存在的情况下，BET法可单独适用；若无法排除NEPs的存在，则应使用MAT进行检测。

此外，EP 11.8在MAT方法的标准化、质量控制和结果接受标准等方面进行了细致修订，与前一版本EP 11.0相比有显著变化。

三、典型案例分享：成功获批实践

作为国内最早协助客户完成欧盟EP家兔法热原检测替换的企业，湖州申科在MAT法规解读、方法验证及申报支持方面积累了丰富经验。

近期实战成果：

2025年，湖州申科协助客户完成EP 2.6.30 MAT方法的样品测试、验证和申报工作，并于2026年初成功获得欧盟官方批件。

核心能力支撑

（1）合规试剂保障

•  细胞来源合规：获得ATCC商业化授权，确保溯源清晰；

•  权威性能验证：与权威机构联合开展性能验证，符合EP 2.6.30标准；

•  广泛适用性：覆盖抗体、疫苗、血液制品、中药注射剂、医疗器械、化药、原辅料等多种产品类型。

（2）专业技术支持

•  一站式MAT解决方案：提供从方法开发、验证到申报资料撰写的全程技术支持；

•  法规深度解读：实时追踪EP、USP、ChP等国内外法规动态，精准捕捉法规方向；

•  成功交付经验：以典型案例为基础，协助客户降低方法转型过程中的试错成本。

四、申报攻略：MAT验证的关键步骤

基于成功案例经验，MAT申报的核心流程可归纳如下：

步骤一：方法选择与试剂盒评估

MAT作为欧洲药典收录方法，使用时无需进行全面方法验证，仅需开展样品适用性验证。但所选用的MAT试剂盒供应商应已完成符合ICH Q2(R2)要求的全面性能验证，包括线性、范围、检出限、定量限、中间精密度、重复性、专属性等指标。

步骤二：样品适用性验证

必做清单：

•  内毒素标准曲线合格（R² > 0.975）；

•  待检制剂不影响单核细胞的IL-6表达；

•  待检制剂对IL-6释放检测无干扰；

•  待检制剂对非内毒素热原（NEPs）回收无干扰。

NEPs验证要求：

•  使用至少2种NEPs配体对检测系统进行验证；

•  至少1种NEPs需加标至待检制剂中；

•  如历史批次中有经证实受NEPs污染的阳性样品，可优先使用。

五、结语：把握法规转型窗口期

EP 2.6.8中家兔法被取代，标志着欧洲药典在热原检测领域全面实现从动物试验向体外方法的转型。进入2026年以来，EDQM现场核查已明确将“有无NEPs控制策略”列为高频缺陷项，对于尚未完成MAT方法转型的企业而言，合规窗口期正在逐步收窄。

湖州申科依托自主研发试剂的经验积累，能够根据样品特殊性精准提供解决方案，直面欧美申报的“发补”要求。我们不仅助力企业完成关键技术变更与NEPs风险评估，更能提供不同类型样品的前处理方法开发及全套验证方案，从源头化解合规不确定性，高效推进产品出海进程。

如您正在准备MAT方法验证或面临相关申报问题，欢迎联系我们获取专题技术支持和法规解读资料。