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细胞种属鉴别检测
生产细胞培养常有着相近的营养条件与环境因素,在传代的培养过程中很容易发生细胞间交叉污染。法规要求了对细胞库的种属鉴定,主要目的在于:
① 确认细胞来源
② 防止交叉污染
③ 识别细胞变异
④ 帮助研究细胞进化和分化
总的来说,细胞种属鉴别检测在生物制品中的目的是确定所使用的细胞种属,从而确保产品的质量、安全性和合规性。
基于此,我们利用多重PCR开发出用于10 种常见细胞的种属鉴别(牛/猪/犬/小鼠/大鼠/中国仓鼠/非洲绿猴/恒河猴/猫/人)和种属间细胞交叉污染的检测试剂盒,也提供多种属近百种细胞的动物细胞DNA条形码试剂盒。另外,也可以选择NGS技术平台能一次性得到最全面的细胞库信息。
细胞种属鉴别检测平台
• 多重PCR:
细胞种属鉴别检测采用多重PCR检测技术,搭配我们自主研发生产的检测试剂盒,原理是利用常用物种的细胞线粒体上3 个相对保守的基因,设计出可同时检测10 种常见细胞的种属鉴别,灵敏度可达2 个细胞/反应,交叉污染检测限至少达到1/1000 细胞污染的水平,扩增后搭配琼脂糖凝胶电泳完成判断,相较于同工酶法,检测速度更快、灵敏度更高、试剂采购更容易,也比STR图谱分析法所鉴别的种属范围更广。
• DNA条形码:
通过对物种特定DNA序列进行扫描和比较来鉴定不同细胞的生物物种的技术。
具体操作步骤包括:
① 选择合适的DNA条形码区域(COI)
② 前处理采用DNA免提取法
③ 序列分析
④ 数据解读
此方法受到测序分辨率的限制,对细胞种属间交叉污染检测灵敏度较低,因此建议结合湖州申科多重PCR与NGS平台,作进一步研究。
• NGS (二代测序):
通过NGS技术,对不同物种细胞DNA序列的高通量测序,利用比对算法将其与数据库中已知物种DNA序列比对,从而确定待测样本中可能存在的细胞种属。
此外,还可以进行基于组装和聚类的无参考基因组分析,对未知细胞种属进行鉴定分类。
NGS可以一次性获取下面讯息:
① 物种鉴定
② 种属来源
③ 染色体大结构变化
④ 遗传漂变
⑤ 外源因子污染
⑥ 种间污染
⑦ 种内污染
◼︎ 样品适用性验证服务
针对样品进行适用性验证,搭配试剂盒全面性能验证报告,确保检测结果准确性与可信度。
• 精密度(重复性、中间精密度)验证
• 样品回收率(准确性)验证
◼︎ 样品检测服务
利用多重PCR、DNA条形码和NGS等方法对客户提供的样品进行细胞种属鉴别,出具相应的检测报告。
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