核酸检测方法，特别是实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR方法）由于其灵敏度高、特异性强、检测时间短等优点，已被广泛应用于生物制品质量控制检测中。生物制品（抗体/重组蛋白/疫苗等）质量控制核酸检测包括了多方面内容，如细菌、真菌、支原体检测，宿主细胞核酸残留、外源病毒、遗传稳定性、细胞鉴别分析检测等。

随着细胞、基因治疗产品等新型生物制品的快速发展，各国监管机构及法规也要求采用经过验证的核酸检测方法以保证药物疗效及质量。如可以使用qPCR方法来检测外源微生物，但需要经过全面验证并确认可替代传统方法。

qPCR方法一般需要经过较复杂的样品前处理和后续的核酸扩增，其灵敏度高，易受到外界因素的影响。相比于其他一些检测方法，如培养法、免疫检测法，qPCR方法对QC实验能力提出了较大挑战，特别是实验人员对核酸提取和扩增技术的实验能力尤为重要！

QC实验室采用qPCR方法，需要建立完整的验证方案。验证方案应包括对验证参数和标准的评估，实现对方法的适用性及性能评估；当验证参数符合预定的标准时，该方法才可被接受并考虑进一步验证。验证参数被分为两组:方法接受参数（内部验证期间由研发者验证）和方法性能参数（不同实验室间进行评估），并需根据定量/定性试验类型确定验证参数。

▼表1 qPCR方法不同检验类型验证参数

生物制品QC核酸检测一站式解决方案

以2020版《中国药典》为例，PCR方法验证和确定要求已收录在以下5项指导原则中：

 <9101>分析方法验证指导原则

 <9201>药品微生物验证替代方法验证指导原则

 <9099>分析方法确认指导原则

 <9100>分析方法转移指导原则

 <9012>生物样品定量分析方法验证指导原则

为保证生物制品QC核酸检测结果的稳定，湖州申科组合推出rHCDpurify^®前处理系统和实时荧光PCR检测系统，全面验证和植入了湖州申科生物制品质量控制核酸检测相关试剂盒的检测程序，实现核酸检测的一键操作。

1. qPCR实验能力验证服务

湖州申科组合核酸前处理设备和qPCR仪，全面验证生物制品QC核酸检测相关试剂盒，为QC实验室提供全面的qPCR实验能力建设和验证服务，以更快速、全面响应、支持客户需求，解决问题。

2. rHCDpurify^®前处理系统

磁珠分离法，即利用磁珠的磁性，通过外加磁场对核酸进行收集洗脱。该方法由于磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸达到浓度、纯度的要求，且实验过程安全无毒，符合环保理念。该方法能实现自动化、大批量实验操作，操作简单且用时短，整个流程大约可在45分钟内完成。

型号：SKRDP-32Pro

• 全面验证符合法规：专用于生物制品QC中宿主细胞核酸残留、支原体、分枝杆菌等微量核酸提取纯化，内置配套试剂盒专业程序，并经过完整的性能验证评估。

• 精准控温性能卓越：温度控制范围5-125℃，控制精度不超过±1℃，震动混合功能多模式多档可调。裂解提取效率高，磁珠效率可高达98%以上，且低吸附低磁珠残留。

• 自动操作结果稳定：多达32通道，独特控制面板，内置SHENTEK多款试剂盒提取程序，向导式界面实现一键操作；体系封闭，设置紫外灯防止交叉污染；适合微量DNA提取，灵敏度可达fg级别，回收率稳定集中于70-130%，保证持续稳定的核酸提取纯化。

• 日志存储数据追踪：满足数据审计追踪要求，运行日志存储数量可达8000多条。

• 用户管理保障可靠：增加了层级权限，易于用户分级管理。终身提供及时的维修、维护服务。

3. 实时荧光PCR检测系统

SHENTEK-96S实时荧光PCR检测系统，为湖州申科近期推出的国产化PCR检测仪，不受进口设备货期不定及技术支持不及时的限制。

型号：SHENTEK-96S

• 品质保证的硬件环境：控温技术精准高效，孔间温差仅为±0.1℃，最大升降温速度可达4.0℃/s。低噪音、低能耗、低维护成本，高信噪比，无需背景校正。

• 卓越简便的软件功能：内置SHENTEK试剂盒相关程序，向导式操作一键完成实验设置。数据分析模式多样，包括定性/定量、标准熔解曲线、相对定量、等温扩增等并可根据用户需求设定实验程序。

• 符合法规的检测平台：符合中国《药品生产质量规范》和《中国药品检验标准操作规范和药品检验仪器操作规程》；符合美国FDA法规 21 CFR Part 11电子记录管理的要求，可对接LIMS系统满足数据审计追踪和权限管理。

• 全面验证且性能稳定：可与提取系统实现性能上的完美衔接，保证结果稳定；检测实验数据完全满足生物制品核酸检测方法的验证要求，线性范围10º  ～ 10¹º 个拷贝，重复性CV<1.00%，样品线性度| r | ≥ 0.9990，灵敏度可高达1个拷贝。

检测案例--CHO DNA残留检测

标准曲线相关参数 ：斜率-3.29443，扩增效率 101.2%，相关系数0.99958

图3 CHO DNA检测标曲线性扩增图